多位微量反應(yīng)系統(tǒng)分析過(guò)程中必須重視的問(wèn)題
多位微量反應(yīng)系統(tǒng)是常用的分析設(shè)備,其通過(guò)有別于氣樣組分的惰性氣體作為載氣將氣樣送入色譜柱中,由于不同組分在運(yùn)動(dòng)中進(jìn)行反復(fù)多次的分配或吸附與解吸附,由于各組分在色譜柱中的吸附解吸的能力不同,不同組分終得以分離;當(dāng)組分流出色譜柱后,立即進(jìn)入檢測(cè)器。
多位微量反應(yīng)系統(tǒng)能夠?qū)悠方M分轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),電信號(hào)大小與被測(cè)組分量或濃度成正比;信號(hào)放大并實(shí)時(shí)記錄,得到氣相色譜圖,從而根據(jù)譜圖的峰位及峰強(qiáng)等信息對(duì)氣樣進(jìn)行定性定量分析。實(shí)際檢測(cè)中,難以將反應(yīng)產(chǎn)生的所有的氣體收集并通入氣相色譜等檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行定性和定量的分析。即使可行,此種方法也是程序繁瑣、效率低下,且并不能反映發(fā)生氣體反應(yīng)時(shí)實(shí)時(shí)情況。
多位微量反應(yīng)系統(tǒng)根據(jù)細(xì)菌的不同生物學(xué)性狀及其代謝產(chǎn)物的差異,可采用多種生化反應(yīng)系統(tǒng)鑒定細(xì)菌,現(xiàn)已有商品化的成套產(chǎn)品,由10~24項(xiàng)生化指標(biāo)組合而成,通過(guò)對(duì)結(jié)果的判定,得出一個(gè)3~7位的數(shù)據(jù),查閱編碼手冊(cè)即可獲得相應(yīng)的細(xì)菌名稱。本系統(tǒng)亦可與計(jì)算機(jī)聯(lián)合作用,則更為快速簡(jiǎn)便。
多位微量反應(yīng)系統(tǒng)是流動(dòng)相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡;系統(tǒng)開始工作時(shí)未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈;在注入樣品時(shí)不注意混入了空氣。
為了避免這類問(wèn)題的出現(xiàn),多位微量反應(yīng)系統(tǒng)分析過(guò)程中必須重視:
一、對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理,常用的脫氣方法有以下幾種:
1.吹氦脫氣法
使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,在0.1Mpa壓力下,以約60ml/min流速通入流動(dòng)相10-15min以驅(qū)除溶解的氣體。此法使用于所有的溶劑,脫氣效果較好,但在國(guó)內(nèi)因氦氣價(jià)格較貴,本法使用較少;
2.加熱回流法
此法的脫氣效果較好;
3.抽真空脫氣法
此時(shí)可使用微型真空泵,降壓至0.05-0.07MPa即可除去溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過(guò)濾機(jī)械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會(huì)引起混合溶劑組成的變化,故此法適用于單一溶劑體系脫氣。多位微量反應(yīng)系統(tǒng)對(duì)多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合,以保證混合后的比例不變。
4.超聲波脫氣法
它是目前實(shí)驗(yàn)室使用廣泛的脫氣方法,將配制好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡(jiǎn)便,基本能滿足日常分析的要求。